亚洲欧洲AV精品无码乱码小说,狂躁美女大BBBBBB,两片肥肉中间溪水潺潺,寡妇BWWBWWBWW

歡迎進(jìn)入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站!
13482402338
技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁(yè)  -  技術(shù)文章  -  神經(jīng)上皮瘤細胞;SK-N-MC實(shí)驗報告

神經(jīng)上皮瘤細胞;SK-N-MC實(shí)驗報告

更新時(shí)間:2024-05-30點(diǎn)擊次數:881

神經(jīng)上皮瘤細胞;SK-N-MC實(shí)驗報告:

一、分離與培養:

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長(cháng)至80%融合時(shí),棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。


TEL:021-61210612

掃碼加微信

丽江市| 隆化县| 红安县| 杨浦区| 龙陵县| 平湖市| 临猗县| 和政县| 宁南县| 新丰县| 焦作市| 嘉荫县| 左贡县| 景德镇市| 宜兰县| 远安县| 夏河县| 丽水市| 德昌县| 乌鲁木齐县| 安西县| 白沙| 平乡县| 镶黄旗| 永济市| 汤原县| 抚松县| 牙克石市| 金寨县| 淳安县| 海门市| 铜鼓县| 绍兴县| 牡丹江市| 河曲县| 易门县| 鄂托克旗| 峨眉山市| 杭锦旗| 清丰县| 昆明市|